المعرفة الميكروبية التي تريدها

المعرفة الميكروبية التي تريدها

الكائنات الدقيقة هي مجموعة من الكائنات الدقيقة الموجودة على نطاق واسع في الطبيعة وغير مرئية للعين المجردة ويجب تكبيرها مئات أو آلاف أو حتى عشرات الآلاف من المرات بمساعدة المجهر الضوئي أو المجهر الإلكتروني. تتميز بمزايا الحجم الصغير والبنية البسيطة والتكاثر السريع والتنوع السهل والقدرة القوية على التكيف مع البيئة.

تصنيف الكائنات الحية الدقيقة:

هناك أنواع عديدة من الكائنات الحية الدقيقة ، على الأقل أكثر من 100 نوع 000. وفقًا لتركيبها ، يمكن تقسيم التركيب الكيميائي وعادات المعيشة والاختلافات الأخرى إلى ثلاث فئات.

تتمتع نواة الخلية الميكروبية حقيقية النواة بدرجة أعلى من التمايز ، بما في ذلك الغشاء النووي والنواة والكروموسومات ؛ يحتوي السيتوبلازم على عضيات كاملة (مثل الشبكة الإندوبلازمية والريبوسوم والميتوكوندريا ، إلخ). تنتمي الفطريات إلى هذا النوع من الكائنات الحية الدقيقة.

الخلايا الميكروبية بدائية النواة لها درجة منخفضة من التمايز النووي ، فقط النيوكليوبلازم البدائي ، لا يوجد غشاء نووي ونواة ؛ العضيات ليست كاملة جدا. هناك العديد من الأنواع من هذه الكائنات الحية الدقيقة ، بما في ذلك البكتيريا ، اللولبيات ، الميكوبلازما ، الريكتسيا ، الكلاميديا ​​والفطريات الشعاعية.

لا تمتلك الكائنات الدقيقة اللاخلية بنية خلوية نموذجية ولا نظام إنزيمي لتوليد الطاقة ، ويمكنها فقط النمو والتكاثر في الخلايا الحية. تنتمي الفيروسات إلى هذا النوع من الكائنات الحية الدقيقة.

فصل وتنقية الكائنات الحية الدقيقة

تسمى الثقافة الميكروبية التي تحتوي على أكثر من نوع واحد الثقافة المختلطة. إذا كانت جميع الخلايا في مستعمرة مشتقة من خلية أبوية واحدة ، فإن المستعمرة تسمى الثقافة النقية. عند تحديد الأنواع البكتيرية ، يُطلب من الكائنات الحية الدقيقة المستخدمة عمومًا أن تكون مستنبتات نقية. تسمى عملية الحصول على الثقافة النقية بالفصل والتنقية ، وهناك طرق عديدة.

1. طريقة صب لوحة

أولاً ، يتم تخفيف المعلق الميكروبي في سلسلة ، ويتم خلط كمية معينة من التخفيف تمامًا مع وسط أجار المغذي المذاب الذي يتم الاحتفاظ به عند درجة 40-50 تقريبًا ، ثم يُسكب الخليط في طبق بتري معقم. بعد التصلب ، تم تحضين الصفيحة رأسًا على عقب في غرفة ثابتة. يتم ضرب خلية واحدة لتشكيل مستعمرة ، ويتم أخذ مستعمرة واحدة لعمل تعليق ، وتتكرر الخطوات المذكورة أعلاه عدة مرات للحصول على ثقافة نقية.

2. طريقة طلاء اللوحة المسطحة

أولاً ، يتم تخفيف المعلق الميكروبي بشكل صحيح ، ويتم وضع كمية معينة من التخفيف على صفيحة أجار معقمة مغذية صلبة ، ثم ينتشر التخفيف بالتساوي على سطح الوسط بملعقة زجاجية معقمة. يمكن الحصول على مستعمرة واحدة عن طريق الحضانة عند درجة حرارة ثابتة.

3. طريقة الكتابة على اللوحة

أسهل طريقة لعزل الكائنات الحية الدقيقة هي وضع الخطوط. ضع كمية صغيرة من الثقافة على اللوحة باستخدام حلقة معقمة. هناك طرق عديدة للكتابة. طرق الكتابة الشائعة التي من المرجح أن تظهر مستعمرة واحدة هي طريقة القطع ، وطريقة المنحنى ، وطريقة التربيع ، وطريقة الإشعاع ، وطريقة الشبكات الأربعة. عندما تتحرك حلقة التلقيح للخلف على سطح الوسط ، يتم تخفيف السائل البكتيري الموجود في حلقة التلقيح تدريجيًا ، وفي النهاية تنتشر خلية واحدة على الخط المرسوم. بعد الزرع ، تنمو كل خلية لتصبح مستعمرة.

4. طريقة الثقافة الإثرائية

طريقة ومبدأ طريقة ثقافة الإثراء بسيطة للغاية. يمكننا تهيئة الظروف التي تسمح فقط للميكروبات المرغوبة بالنمو ، وفي ظل هذه الظروف يمكن للميكروبات المرغوبة أن تتنافس بفعالية مع الميكروبات الأخرى وتتجاوز الميكروبات الأخرى بكثير من حيث القدرة على النمو. إذا كان سيتم عزل بعض الطفيليات الملزمة ، فيجب تلقيح العينات في مجموعات الخلايا المضيفة المعرضة للتأثر بالنمو بأعداد كبيرة. يمكن الحصول على البكتيريا الطفيلية النقية عن طريق البذر المتكرر.

5. الطريقة اللاهوائية

في المختبر ، من أجل عزل بعض البكتيريا اللاهوائية ، يمكن استخدام أنبوب اختبار يحتوي على الوسط الأصلي كوعاء للزرع ، ويمكن تسخين أنبوب الاختبار في حمام مائي مغلي لعدة دقائق لطرد الأكسجين المذاب في الوسط . ثم يتم تبريده وتلقيحه بسرعة. بعد التلقيح ، تمت إضافة البارافين المعقم إلى سطح الوسط لعزل الوسط عن الهواء. طريقة أخرى هي استبدال الغاز في الوسط بـ N2 أو CO2 بعد التلقيح ، ثم إغلاق فم أنبوب الاختبار فوق اللهب. في بعض الأحيان من أجل عزل بعض البكتيريا اللاهوائية بشكل أكثر كفاءة ، يمكن تلقيح العينة المعزولة في الوسط ، ومن ثم يمكن وضع طبق بتري في جهاز استنبات لاهوائي مغلق تمامًا.

6. طريقة عزل خلية واحدة (أو بوغ واحد)

يجب اتخاذ طريقة الفصل الدقيق لعزل الخلايا المفردة أو الأفراد الفرديين مباشرة من مجموعات مختلطة من أجل الثقافة للحصول على ثقافة نقية. بالنسبة للكائنات الدقيقة الأكبر حجمًا ، يمكن استخراج فرد واحد باستخدام الشعيرات الدموية. بالنسبة للكائنات الحية الدقيقة ذات الأفراد الصغار نسبيًا ، يلزم استخدام المعالج الدقيق لانتقاء خلايا ميكروبية مفردة أو جراثيم ذات شعيرات أو إبرة مجهرية ، وخطاف ، وحلقة ، وما إلى ذلك تحت المجهر للحصول على ثقافة نقية. تتميز طريقة الفصل أحادية الخلية بمتطلبات عالية نسبيًا على تقنية التشغيل.

الثقافة الميكروبية

1. وفقًا لما إذا كان الأكسجين مطلوبًا أثناء الاستزراع ، يمكن تقسيمه إلى فئتين: الثقافة الهوائية والثقافة اللاهوائية.

الثقافة الهوائية: تُعرف أيضًا باسم "الثقافة الهوائية". وهذا يعني أنه عندما يتم زراعة هذا الكائن الدقيق ، فإنه يحتاج إلى إضافة الأكسجين ، وإلا فإنه لن ينمو بشكل جيد. في المختبر ، يتم الحصول على مزارع مائلة عن طريق الحصول على هواء معقم من الخارج من خلال سدادات قطنية. يتم اهتزاز معظم الثقافة السائلة في دورق Erlenmeyer بواسطة شاكر ، بحيث يمكن للهواء الخارجي أن يدخل الزجاجة باستمرار.

الثقافة اللاهوائية: تُعرف أيضًا باسم "الثقافة اللاهوائية". لا تتطلب هذه الكائنات الدقيقة الأكسجين للمشاركة في الزراعة. في عملية زراعة الكائنات الحية الدقيقة اللاهوائية ، فإن النقطة الأكثر أهمية هي إزالة الأكسجين من الوسط.

2. وفقًا للحالة الفيزيائية للوسيلة ، يمكن تقسيمها إلى فئتين: الثقافة الصلبة والثقافة السائلة.

الثقافة الصلبة: هي طريقة لتلقيح السلالات في وسط صلب سائب وغني بالمغذيات ، واستزراع الكائنات الحية الدقيقة في ظل ظروف مناسبة.

الثقافة السائلة: في التجارب ، يمكن للثقافة السائلة أن تجعل الكائنات الحية الدقيقة تتكاثر بسرعة وتحصل على عدد كبير من الثقافات. في ظل ظروف معينة ، تعد أيضًا طريقة فعالة للكائنات الحية الدقيقة لاختيار البكتيريا وإثرائها.

توفر BKMAM biotech المواد الاستهلاكية المختبرية المقابلة للثقافة الميكروبية:

أطباق بتري بلاستيكية مستديرة / مربعة يمكن التخلص منها:

مادة البوليسترين عالية الشفافية (PS) ؛

l السطح أملس ومسطح ، ولا يوجد تشويه بصري للخلايا تحت الملاحظة المجهرية ؛

ل تصميم التراص يجعل التكديس والتخزين أسهل ؛

ل تعقيم أكسيد الإيثيلين (EO) ؛

ل ارتداء ومقاومة التآكل.

عصا / حلقة التلقيح البلاستيكية التي يمكن التخلص منها:

مادة البوليسترين (PS) ؛

مضاد للتلوث ، الذيفان الداخلي ، DNase ، RNase وخالي من البيروجينات ؛

تم تعقيم العبوة المستقلة ؛

صنعة دقيقة ومواصفات كاملة ؛

مفرشة الخلايا البلاستيكية القابل للتصرف ، مفرشة البكتيريا:

مادة البوليسترين (PS) ؛

مضاد للتلوث ، الذيفان الداخلي ، DNase ، RNase وخالي من البيروجينات ؛

تصميم على شكل حرف L ، سهل الاستخدام ؛

استخدام لمرة واحدة ، خفيف ومريح.

الفولاذ المقاوم للصدأ / لوحات مواصفات معقمة يمكن التخلص منها:

لوحة مواصفات الفولاذ المقاوم للصدأ مصنوعة من الفولاذ المقاوم للصدأ ، ولوحة المواصفات التي تستخدم لمرة واحدة مصنوعة من مادة البولي بروبيلين الصالحة للأكل (PP).

مضاد للتلوث ، الذيفان الداخلي ، DNase ، RNase وخالي من البيروجينات ؛

منطقة التلطيخ موحدة بشكل صارم

جانب واحد من لوحة المواصفات مجهز بمقبض سهل التشغيل

عبوة واحدة معقمة ومختومة لتجنب التلوث الثانوي لأخذ العينات والخطأ في النتائج

الاستخدام لمرة واحدة لتجنب انتقال التلوث وتقليل عبء العمل

مرحبا بكم في التعاون معنا

بإخلاص

مايكل بينج

michael@bkmbio.com