يجب على الأصدقاء الذين يجرون تجارب مرتبطة بالخلية في كثير من الأحيان استخدام طرق تجميد الخلايا. باختصار ، التخزين المجمد للخلايا هو حفظ الخلايا في بيئة ذات درجة حرارة منخفضة لتحقيق الغرض من الحفظ على المدى الطويل. سيكون للخلايا درجة معينة من الطفرة أثناء عملية الانتقال. من أجل ضمان استمرار استخدام الخلايا في حالة تلوث الخلية والطفرة ، تستخدم بعض الخلايا عادةً للتجميد.
مبدأ تجميد الخلية
أحد المبادئ في عملية تجميد الخلايا واستعادتها هو "الاندماج المجمد البطيء" للحفاظ على حيوية الخلايا إلى أقصى حد. ببساطة ، يجب أن يكون بطيئًا عند التجميد والتبريد ، ويجب تسخينه بسرعة عند التعافي من درجة حرارة منخفضة. سبب التجميد البطيء هو أنه إذا تم وضع الخلايا مباشرة في بيئة ذات درجة حرارة منخفضة للغاية مثل النيتروجين السائل ، فإن الخلايا تشكل بلورة جليدية كبيرة ، مما يؤدي إلى إتلاف الخلايا.
إذا قمت بتجميده ببطء ، يمكن أن تجفف الخلايا ببطء لتحقيق الغرض من حماية الخلايا. بالإضافة إلى ذلك ، عند التعافي ، فإنه يمنع أيضًا بلورات الجليد الصغيرة من تكوين بلورات جليدية كبيرة ، أي البلورات الثقيلة لبلورات الجليد. لذلك ، عندما يقوم كل شخص عادة بتجميد الخلايا ، فإنه يتسبب دائمًا في خسارة الخلايا ، والتي من المحتمل أن يكون لها تأثير في خطوة التجميد.
عدة طرق لتجميد الخلية
الطريقة اليدوية: عادة ما يتم تخزين الخلية المجمدة في النيتروجين السائل. طريقة التشغيل اليدوي هي تبريد التدرج اللوني في الثلاجة. احفظ الخلايا في أنبوب التخزين المجمد ، وضعها في بيئة ثلاجة تبلغ 4 درجات مئوية ، -20 درجة مئوية ، -80 درجة مئوية بالترتيب. مجمدة لمدة 24 ساعة عند -80 درجة مئوية قبل التحويل إلى النيتروجين السائل. لا يتطلب التبريد اليدوي مكملات إضافية للمواد الاستهلاكية الأخرى. يمكن تشغيله يدويًا. إنه أبسط ، لكنه ليس بسيطًا. العملية الفعلية مزعجة. والتأثير ليس جيدًا جدًا ، لأن طريقة التبريد هذه لا تزال غير موحدة ، ولا تنطبق بالضرورة على الخلايا الأكثر هشاشة.
صندوق التبريد المتدرج: صندوق التبريد المتدرج المباع في السوق يستخدم بشكل خاص في التبريد المنتظم لعملية التجميد. عادة ما تكون سرعة التبريد -1 درجة / دقيقة. ضع أنبوب التخزين المجمد في صندوق التبريد المتدرج ، ثم ضع صندوق التبريد المتدرج مباشرة في بيئة الثلاجة بدرجة حرارة -80 درجة مئوية لقضاء الليل بدون عملية التدرج اليدوي. ثم قم بخفض أنبوب الإيداع ووضعه في النيتروجين السائل. يعتبر تأثير استخدام صناديق التبريد المتدرجة أفضل ، لأن صناديق التبريد التجارية في السوق يمكن أن تضمن معدل تبريد موحد تقريبًا.
هناك نوعان من صناديق التبريد المتدرجة الشائعة في السوق. هناك حاجة لإضافة الأيزوبروبيل ، وعادة ما يكون صندوق الكمبيوتر. عند الاستخدام ، يتم إضافة الأيزوبينول إلى خط القياس في الصندوق عند استخدامه. يستخدم الأيزوبروبانول كناقل لتخزين وتوزيع الحرارة.
نوع آخر لا يحتاج إلى إضافته مع الأيزوبروبيل ، الرغوة ، ويمكن وضع الفريزر مباشرة أثناء الاستخدام ، وهو أكثر ملاءمة للعمل.
يوصى باستخدام صندوق تبريد الأيزوبروبانول لاستبدال السائل بعد استخدامه عدة مرات ، ولكن نظرًا لأن الأيزوبروبانول سائل ضار يسبب ضررًا للتجارب والبيئة ، فيمكن استخدامه عادةً عدة مرات. ومع ذلك ، فمن الضروري التأكد من أن السائل بكمية معينة.
التخزين المجمد غير المبرمج: استخدم السوائل المجمدة غير المبرمجة التي يمكن شراؤها من السوق. بالمقارنة مع السائل المجمد التقليدي ، يمكن أن يقلل المكون الداخلي من الأضرار التي لحقت بخلايا بلورات الثلج ، بحيث لا تكون هناك حاجة لاستخدام التدرج اللوني للتبريد ، كما أنه لا يتطلب صندوق تبريد متدرج. يمكن وضع التخزين المجمد مباشرة في بيئة ثلاجة تبلغ -80 درجة مئوية.
العديد من عينات الخلايا ثمينة للغاية. بالإضافة إلينا ، يجب أن نستخدمه عند إجراء التجارب. تحتاج أيضًا إلى اختيار منتجات جيدة قدر الإمكان في اختيار المنتجات ذات الصلة. حدد أنبوب التخزين المجمد بجودة مؤهلة ، وحاول استخدام أداة التبريد المتدرج للتجميد ، وتعظيم ضمان تقليل التلف للخلايا لتجنب الخسارة الصغيرة بسبب الطفيفة.